一、细胞基本属性
- 细胞名称:KU812人外周血嗜碱性白血病细胞
- 细胞别称:KU - 812;人嗜碱性粒细胞白血病细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年患者来源(具体性别及病史信息保密)
- 组织来源:外周血(嗜碱性粒细胞白血病患者)
- 生长特性:悬浮生长(部分细胞可贴壁,形成小集落)
- 细胞形态:圆形或类圆形,胞质透亮,核质比高
- 细胞代数:建议使用P5 - P15代(维持白血病细胞表型稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10%FBS + 1%双抗+1mM丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5%CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10%DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖细胞密度与培养基新鲜度)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于培养箱
- 传代标准:悬浮细胞密度达1×10⁶ cells/mL(或贴壁细胞融合度达80%)
- 传代比例:1:2至1:3(悬浮细胞直接稀释,贴壁细胞需轻柔吹打)
- 注意事项:
- 悬浮细胞需每日观察密度,避免超过2×10⁶ cells/mL
- 贴壁细胞建议使用0.25%Trypsin - EDTA消化(37℃作用3分钟)
- 换液时保留部分原培养基以维持细胞适应性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10%DMSO + 20%FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,缓慢滴加冻存液重悬
- 程序降温:4℃30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:β - 己糖胺酶释放实验(P8代内维持嗜碱性粒细胞特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供温度监测数据)
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
- 细胞复苏存活率低于85%(经第三方检测确认)
- c - MYC基因表达水平与质控数据不符
- 不予重发情形:
- 未按说明书进行离心换液导致细胞损失
- 使用含高浓度细胞因子的非标准培养基
- 未定期检测支原体引发交叉污染
- 超过建议代次(P15)后出现表型漂移