一、细胞基本属性
- 细胞名称:KLE人子宫内膜癌细胞
- 细胞别称:KLE细胞;子宫内膜腺癌细胞;子宫内膜癌细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自子宫内膜腺癌患者原代组织(临床分期及病理信息可溯源)
- 组织来源:子宫内膜组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样多角形,单层贴壁呈铺路石样排列
- 细胞代数:P10 - P20(经STR鉴定确认遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约60 - 72小时(建议维持30% - 50%融合度以保持增殖活性)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后静置培养箱4小时再换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱落
- 注意事项:
- 避免频繁观察扰动(影响贴壁稳定性)
- 首次传代建议保留原代培养基50%以维持适应性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测贴壁率(应≥85%)
- 功能验证:CCK - 8增殖曲线检测(P10代细胞应维持标准倍增时间)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度记录异常导致细胞死亡(需提供物流温度监控记录)
- 7日内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏后贴壁率低于80%(需提供明场照片及操作记录)
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 未使用配套胶原包被培养器皿
- 自行更改培养基关键成分(如FBS品牌或浓度)
- 未按推荐密度进行传代导致老化
- 实验操作污染导致交叉感染