一、细胞基本属性
- 细胞名称:人卵巢颗粒细胞瘤细胞(KGN)
- 细胞别称:KGN细胞;卵巢颗粒细胞瘤细胞;卵巢颗粒细胞癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:来源于卵巢颗粒细胞瘤患者组织,保留肿瘤细胞特征
- 组织来源:卵巢颗粒细胞瘤组织(病理分级明确)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:多角形或梭形,核质比高,单层增殖时呈不规则排列
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数,确保功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS + 1%双抗+特定生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度与血清浓度)
- 供应限制:仅限肿瘤机制研究,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:酒精擦拭表面后静置培养箱4小时,待细胞贴壁后换液。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液。
- 37℃消化2 - 3分钟,轻柔拍打促进脱落。
- 注意事项:
- 消化终止需立即加入含血清培养基。
- 传代后12小时观察贴壁情况,必要时补加生长因子。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管。
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞活力(台盼蓝染色≥90%)。
- 功能验证:雌激素分泌检测(P5代细胞应维持基础分泌功能)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)。
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)。
- 细胞复苏后活力低于85%(需提供染色照片及视频)。
- 细胞STR谱系与数据库不匹配。
- 不予重发情形:
- 未按说明书进行胶原包被导致贴壁失败。
- 使用非指定培养基或自行修改添加成分。
- 实验操作污染导致细胞状态异常。
- 未按要求定期进行支原体预防检测。
(注:本产品需在生物安全二级实验室操作,所有实验需符合伦理规范)