一、细胞基本属性
- 细胞名称:KB人口腔表皮癌细胞
- 细胞别称:KB细胞系;口腔表皮样癌细胞;口腔鳞状细胞癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年女性(源自口腔表皮癌患者组织)
- 组织来源:口腔表皮癌组织(原发灶)
- 生长特性:贴壁生长(需经胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样多角形,高核质比,成簇生长
- 细胞代数:推荐使用P5 - P15(维持肿瘤细胞表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含10% DMSO胎牛血清冻存液,液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(依赖血清浓度及细胞密度)
- 供应限制:仅供肿瘤学研究,不可用于药物筛选以外的商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬接种;培养瓶需酒精消毒后静置4小时再换液
- 传代标准:融合度达80% - 90%(贴壁致密但未过度堆积)
- 传代比例:1:3至1:4(建议接种密度3×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:0.25%胰酶 - EDTA消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使脱落,含血清培养基终止
- 注意事项:避免消化不足导致细胞成片脱落;传代后48小时内避免频繁观察扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础冻存液(90% FBS+10% DMSO)
- 细胞密度:冻存浓度1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后程序降温(4℃ 30min→ - 80℃ 24h→液氮)
- 复苏验证:复苏存活率≥85%(台盼蓝法);功能验证需通过CCK - 8检测48小时增殖曲线
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 干冰运输期间温度异常(需提供物流温度记录)
- 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
- STR分型与数据库记录不符(需提供第三方检测报告)
- 细胞复苏后贴壁率低于50%
- 不予重发情形:
- 未使用指定胶原包被培养皿导致贴壁失败
- 自行更改培养基成分引发细胞分化
- 未按规范进行传代(如机械刮除法破坏细胞膜)
- 冻存前未进行梯度血清置换直接冻存