一、细胞基本属性
- 细胞名称：K562人慢性骨髓性白血病细胞系
- 细胞别称：K562细胞；慢性髓系白血病细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：源自53岁女性慢性髓系白血病（CML）患者胸水样本，携带典型Ph染色体（BCR - ABL融合基因）
- 组织来源：骨髓单核细胞
- 生长特性：悬浮生长（可形成松散细胞团）
- 细胞形态：圆形或类圆形，单细胞或小簇悬浮，折光性良好
- 细胞代数：P3 - P10（推荐使用代数，确保基因稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640培养基（含10% FBS + 1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 36小时（与传代密度及培养条件相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶：75%酒精擦拭表面后直接置于培养箱
- 传代标准：细胞密度达1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐初始密度2×10⁵ cells/mL）
- 操作步骤：直接离心收集细胞，按比例分瓶；无需酶消化（悬浮细胞自然分散）
- 注意事项：避免过度离心（建议转速≤200×g）；定期检测支原体污染（每3个月建议PCR筛查）；维持细胞密度在5×10⁴ - 1×10⁶ cells/mL区间
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞，重悬于预冷冻存液；程序降温：细胞冻存管直接转移至-80℃冻存盒过夜，次日转入液氮
- 复苏验证：复苏后24小时台盼蓝染色存活率≥90%；功能验证：BCR - ABL融合基因表达检测（RT - PCR法）
四、售后服务承诺
- 重发标准：1.运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）；2.7天内证实细菌/真菌污染（需提供显微图像及PCR报告）；3.细胞复苏存活率低于85%（台盼蓝染色法）；4.STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形：1.未在48小时内启动复苏流程；2.使用非推荐培养基导致增殖异常；3.未定期检测支原体引发实验污染；4.未按规范进行BCR - ABL基因表达验证
