一、细胞基本属性
细胞名称:人甲状腺癌细胞(Human Thyroid Carcinoma Cells)。细胞别称:K1(GLAG - 66);甲状腺乳头状癌细胞。种属来源:人(Homo sapiens)。年龄性别:成年女性(供体确诊甲状腺乳头状癌)。组织来源:甲状腺乳头状癌组织。生长特性:贴壁生长(依赖基质蛋白附着)。细胞形态:上皮样多角形,核质比高,成簇分布。细胞代数:P5 - P15(确保增殖活性及基因稳定性)。细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清替代物冻存液)。培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)。培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%。冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及低温保护剂),-196℃液氮长期保存。倍增时间:~24 - 48小时(受培养密度及血清浓度影响)。供应限制:仅用于肿瘤机制研究或药物筛选,禁止临床或体内移植。
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴轻柔摇晃解冻,加入5mL预热培养基离心去冻存液。
- 培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于CO₂培养箱,4小时后首次换液。
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)。传代比例:1:3至1:4(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)。
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液。
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使脱落,加入含血清培养基终止。
注意事项:
- 消化完成后需完全中和胰酶(残留酶影响贴壁)。
- 传代后6小时内避免频繁观察扰动细胞贴附。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无动物成分冻存液(含8% DMSO+20%血清替代物)。细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。冻存步骤:
- 消化离心后缓慢逐滴加入冻存液混匀。
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→转移至液氮气相层。
复苏验证:
- 复苏后48小时内检测细胞贴壁率(应≥85%)。
- 功能验证:CCK - 8增殖实验(P8代细胞需保持对数生长期特性)。
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰耗尽或运输温度> - 130℃导致细胞团块溶解(需提供物流温度记录)。
2. 到货7日内经qPCR证实交叉污染(需提供STR比对结果)。
3. 复苏后贴壁率低于80%(需提供相差显微镜图像)。
不予重发情形:
1. 擅自使用胎牛血清替代指定培养基。
2. 未按规范进行胰酶浓度梯度测试导致膜蛋白损伤。
3. 液氮保存容器多次开闭引发温度波动。
4. 超过限定代次(P15)后出现的基因漂移。