一、细胞基本属性
- 细胞名称:JEG-3人绒毛膜癌细胞
- 细胞别称:JEG-3细胞;绒毛膜癌细胞;妊娠绒毛膜癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:妊娠期女性(原代供体为绒毛膜癌患者)
- 组织来源:胎盘绒毛膜组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁呈铺路石状排列
- 细胞代数:P4 - P10(推荐使用代数以保证激素分泌功能)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮气相长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(与培养密度及传代方法相关)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床治疗或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱静置4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:6(根据实验需求调整接种密度)
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶),37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:避免频繁观察影响贴壁稳定性,传代后48小时内避免更换培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:消化离心后缓慢滴加冻存液混匀;程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 转移至液氮罐
- 复苏验证:复苏后48小时检测hCG分泌水平(应≥50mIU/mL),形态学验证:需维持典型上皮样贴壁特征
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供温度追踪记录);2. 72小时内经qPCR证实支原体污染;3. 复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法);4. STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:1. 未使用原厂配套培养基导致功能异常;2. 自行修改冻存程序引发的细胞损伤;3. 超过推荐代数(P10)后出现的功能衰减;4. 未按操作手册进行hCG分泌功能验证