一、细胞基本属性
- 细胞名称:J82人膀胱移行细胞癌(Human Bladder Transitional Cell Carcinoma Cells)
- 细胞别称:J82细胞;膀胱移行细胞癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:膀胱移行细胞癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需适宜细胞外基质支持)
- 细胞形态:不规则多边形或梭形,贴壁后呈现重叠生长特征
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以保证基因稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS + 1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(受培养密度及血清浓度影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精消毒表面,置于CO₂培养箱静置4小时再换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度3×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 避免过度消化导致细胞膜损伤
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:CCK - 8增殖实验(P8代细胞应维持典型生长曲线)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
- 5日内确认支原体或真菌污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏后存活率低于80%(需提供台盼蓝染色照片)
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 未按规范进行预培养直接冻存
- 使用非指定培养基导致细胞异常
- 反复冻融或长时间室温暴露
- 未提供完整污染检测记录即投诉
注:本产品仅供科学研究,操作需符合实验室生物安全规范。