一、细胞基本属性
- 细胞名称:IOSE - 80人正常卵巢上皮细胞系
- 细胞别称:人卵巢上皮细胞;正常卵巢上皮细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无卵巢疾病史)
- 组织来源:卵巢组织表层上皮
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质支持)
- 细胞形态:典型上皮样单层,接触抑制后呈铺路石样排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与遗传背景一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:卵巢上皮细胞专用培养基(含5% FBS及上皮细胞生长因子补充剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(受培养密度及基质条件影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱2小时,待环境稳定
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含钙镁平衡液)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘收缩后终止反应
- 注意事项:
- 避免过度消化(防止细胞间连接蛋白损伤)
- 传代后12 - 24小时更换新鲜培养基以去除残留酶类
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶-2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→转移至液氮
- 复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(要求≥90%)
- 功能验证:角蛋白免疫荧光检测(P5代细胞需维持上皮特异性标志物表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中干冰耗尽或温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明)
- 收货3日内经检测证实细菌/支原体污染(需提交第三方检测报告)
- 复苏后细胞存活率低于90%(台盼蓝染色法验证)
- STR鉴定结果与数据库信息不符
- 不予重发情形:
- 客户未按规范在72小时内复苏细胞
- 使用非推荐培养基或添加剂导致细胞功能异常
- 自行反复冻融导致细胞损伤
- 未进行污染检测直接用于实验