一、细胞基本属性
细胞名称:人子宫内膜癌细胞(Ishikawa)
细胞别称:Ishikawa细胞;子宫内膜腺癌细胞;子宫内膜样腺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:子宫内膜癌女性患者(临床病理信息明确)
组织来源:子宫内膜腺癌组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被表面)
细胞形态:上皮样多角形,核质比高,单层贴壁后呈铺路石样排列
细胞代数:P5 - P10(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:DMEM/F12(含10%FBS + 1%青霉素 - 链霉素+0.01%β - 雌二醇)
培养条件:气相:5%CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:程序降温冻存液(含10%DMSO及胎牛血清),液氮气相长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与雌激素浓度正相关)
供应限制:仅限于肿瘤机制研究,禁止用于药物筛选或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴震荡解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后静置4小时再观察贴壁情况
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(过度生长易导致分化)
传代比例:1:3至1:4(推荐使用0.25%胰酶 - EDTA消化)
消化方法:
- 预温PBS清洗后加入消化液
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察边缘卷曲立即终止
注意事项:
- 维持培养基中雌激素浓度稳定
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:细胞专用冻存液(含10%DMSO + 30%FBS + 基础培养基)
细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
- 消化离心后缓慢滴加冻存液
- 程序降温:4℃30min→ - 80℃24h→液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:ERα受体表达检测(Western Blot验证)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输期间温度异常导致细胞死亡(需物流温度记录)
2. 72小时内证实真菌/支原体污染(需提供电镜扫描证据)
3. 复苏存活率低于80%(规范操作前提下)
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未使用胶原蛋白包被培养瓶导致贴壁失败
2. 自行修改培养基雌激素浓度引发分化异常
3. 未定期进行支原体检测造成交叉污染
4. 超过建议代数(P10)后出现的功能退化
注:本产品需配合ECM凝胶基质使用,培养过程中建议每两周进行一次雌激素受体活性检测以维持细胞特性。