一、细胞基本属性
- 细胞名称：HUVEC+RFP人脐静脉内皮细胞永生化
- 细胞别称：永生化人脐静脉内皮细胞 - RFP标记；HUVEC - Immortalized - RFP
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无心血管疾病史）
- 组织来源：脐静脉内皮组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖明胶包被基质）
- 细胞形态：典型梭形或多角形，表达RFP红色荧光标记，单层融合后呈铺路石样排列
- 细胞代数：P10 - P20（永生化细胞系，确保荧光标记稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Cell Growth Medium（含5% FBS、内皮生长因子及1%青霉素/链霉素，含嘌呤霉素筛选标记）
- 培养条件：气相：5% CO₂，温度：37℃，湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及荧光保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 荧光特性：稳定表达红色荧光蛋白（RFP），流式检测阳性率≥98%
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶：酒精消毒后静置培养箱4小时平衡。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度1×10⁴ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA，37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项：传代后6小时内避免强光照射以保护荧光信号，复苏后首次换液需补充嘌呤霉素维持筛选压力。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO、20% FBS及荧光稳定剂）。
- 冻存密度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：梯度降温程序：4℃平衡30分钟， - 80℃过夜后转入液氮长期储存。
- 质检指标：复苏存活率≥90%，荧光表达率≥95%，血管生成实验验证功能活性。
四、售后服务承诺
- 重发标准：1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供温度记录证明）；2. 到货72小时内经PCR证实支原体污染；3. 荧光表达率低于90%（流式细胞术验证）；4. STR分型与数据库不匹配。
- 免责条款：1. 客户未按手册使用非指定培养基导致荧光丢失；2. 未维持嘌呤霉素筛选压力致标记基因沉默；3. 液氮储存设备故障导致细胞失活；4. 实验操作污染引发的细胞状态异常。
