一、细胞基本属性
细胞名称:人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells)
细胞别称:HUVEC;脐静脉内皮细胞;静脉内皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康新生儿脐带(性别不限,供体筛查无感染性疾病史)
组织来源:脐静脉内壁
生长特性:贴壁生长(依赖明胶包被培养器皿)
细胞形态:单层铺路石样,接触抑制后呈多边形
细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与遗传一致性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Endothelial Cell Growth Medium(含2% FBS+内皮细胞生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(依赖培养密度与基质包被条件)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,加入4mL预热培养基轻柔混匀
培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置培养箱2小时平衡
传代标准:细胞融合度达85% - 90%(常规每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
使用0.1% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺)
37℃消化1 - 2分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
消化后需轻柔吹打避免机械损伤
传代后12小时内更换培养基以去除残留酶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
离心收集细胞后重悬于预冷冻存液
梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥95%)
功能验证:CD31免疫荧光染色及血管形成实验(P5代细胞维持成管能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录证明)
2. 3天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测图像)
3. 细胞复苏存活率低于90%(台盼蓝染色复检)
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 客户延迟复苏超过72小时未处理
2. 未使用明胶包被培养器皿导致贴壁失败
3. 自行修改培养基配方引发细胞状态异常
4. 未按规范进行无菌操作造成污染