一、细胞基本属性
细胞名称:HUT-78人T淋巴细胞白血病细胞
细胞别称:HUT78;T细胞白血病细胞;人恶性T淋巴细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
疾病背景:源自42岁男性T细胞白血病患者外周血
组织来源:外周血单核细胞(经HTLV - 1病毒感染诱导转化)
生长特性:悬浮聚团生长(可形成均质细胞球)
细胞形态:圆形或椭圆形,直径10 - 14μm,核质比高
细胞代数:P5 - P15(建议使用中低代次保持表型稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗+2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与细胞密度及营养状态相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或生物制品生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:观察细胞密度,直接置于培养箱静置培养
传代标准:细胞密度达1×10⁶ cells/mL(建议维持0.5 - 2×10⁶ cells/mL)
传代比例:1:2至1:4(离心后弃旧培养基,新鲜培养基重悬)
注意事项:
避免过度离心(推荐200g×5分钟)
定期检测支原体(建议每3代进行一次PCR检测)
培养液变黄需及时半量换液(保持pH 7.2 - 7.4)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁷ cells/mL(高密度冻存保障复苏效率)
冻存步骤:
离心收集细胞后缓慢混合冻存液
程序降温:4℃平衡30分钟→梯度降温至-80℃→液氮长期储存
复苏验证:
复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能验证:CD3/CD4表面标志物流式检测(阳性率需>95%)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰耗尽导致细胞失活(需提供运输包装完整性证明)
2. 到货7日内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. STR分型与ATCC数据库不匹配
4. 复苏后48小时内细胞贴壁率异常(仅针对悬浮特性验证)
免责条款:
1. 客户未按悬浮细胞规范操作导致聚集沉淀
2. 自行添加细胞因子改变增殖特性
3. 使用非推荐培养基导致细胞分化
4. 液氮储存设备故障造成的冻存管破裂