一、细胞基本属性
1. 细胞名称：Huh-7.5.1人肝癌细胞
2. 细胞别称：Huh7.5.1；Huh-7.5.1；肝癌细胞系
3. 种属来源：人（Homo sapiens）
4. 组织来源：肝细胞癌组织（经体外连续传代筛选建立）
5. 生长特性：贴壁生长（形成致密单层，接触抑制不显著）
6. 细胞形态：上皮样多角形，细胞核大且核质比高，易形成克隆簇
7. 细胞代数：P15 - P25（推荐使用区间以保证基因组稳定性）
8. 细胞规格：1×10⁶ cells/T75培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
9. 培养基：DMEM高糖培养基（含10%FBS+1%双抗）
10. 培养条件：气相：5%CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
11. 冻存条件：无血清冻存液（含10%DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
12. 倍增时间：约24 - 36小时（与血清浓度及传代密度相关）
13. 应用范围：病毒复制研究（如HCV）、药物筛选、肿瘤机制研究
14. 供应限制：仅限于科研用途，禁止用于临床治疗或生物医学产品开发
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速复苏，离心后重悬于预温培养基
- 培养瓶：酒精消毒外壁后直接置于37℃培养箱平衡4小时
2. 传代标准：融合度达90% - 95%（建议每2 - 3天传代一次）
3. 传代比例：1:4至1:6（推荐初始接种密度3×10⁴ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含酚红指示剂）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
5. 注意事项
- 避免消化过度（可能导致细胞团块难以分散）
- 传代后12小时内避免频繁观察，减少环境扰动
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：基础培养基+20%FBS+10%DMSO
2. 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
3. 冻存步骤
- 对数生长期细胞经消化离心后与冻存液混合
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮储存
4. 复苏验证
- 存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：HCV感染实验（P20代需维持病毒易感性）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内经检测证实支原体污染（需提供电镜图像）
- STR分型与数据库记录不一致
- 复苏后活率低于85%（需提供染色检测视频）
2. 不予重发情形
- 客户自行更换培养基导致细胞增殖异常
- 未按规程进行传代造成不可逆损伤
- 液氮保存设备故障导致的反复冻融
- 超说明书范围进行基因编辑操作
