一、细胞基本属性
细胞名称：Huh - 7人肝癌细胞
细胞别称：Huh7；Huh - 7细胞；肝癌细胞系
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：57岁男性（原代取自肝细胞癌组织）
组织来源：肝肿瘤组织（中分化肝细胞癌）
生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
细胞形态：上皮样多角形，单层贴壁可形成致密簇状
细胞代数：P15 - P25（建议控制代次以维持表型稳定性）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%非必需氨基酸）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
倍增时间：约48小时（与血清浓度及传代密度相关）
供应限制：仅限科学研究，禁止用于临床治疗或生物医药体外诊断
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后离心去冻存液，加入预热培养基重悬
- 培养瓶：酒精擦拭外壁，静置4小时后换液以去除运输残留代谢物
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每周传代2 - 3次）
传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁使细胞脱落，立即加入含血清培养基终止
注意事项：
- 贴壁紧密时需延长消化时间至细胞间隙变宽
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以防贴壁不稳
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90% FBS）
细胞密度：冻存浓度5×10^6 cells/mL（高密度保障复苏效率）
冻存步骤：
- 消化离心后缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮气相长期保存
复苏验证：
- 复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：AFP分泌检测（P20代内应维持肝癌标志物表达）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 到货干冰完全挥发且细胞瓶破裂（需提供开箱视频）
2. 7日内经qPCR证实支原体污染
3. 复苏后72小时活率低于80%（需提供染色图片及计数数据）
4. STR分型与数据库记录不符
不予重发情形：
1. 使用无胶原包被培养瓶导致贴壁失败
2. 自行更换为低血清（＜5%）培养基引发生长停滞
3. 未执行逐级复苏直接水浴解冻
4. 超过推荐代次（P25）后出现表型漂移
