一、细胞基本属性
细胞名称:人肝母细胞瘤细胞(Human Hepatoblastoma Cells)
细胞别称:HUH - 6;肝母细胞瘤细胞系;肝癌细胞模型
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:来源于肝母细胞瘤患者(年龄及性别信息受限于供体隐私)
组织来源:肝脏肿瘤组织
生长特性:贴壁生长(需特定细胞外基质支持)
细胞形态:上皮样形态,单层贴壁呈铺路石样排列
细胞代数:P3 - P8(确保基因组稳定性及功能性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗+肝细胞生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(受培养基成分及接种密度影响)
供应限制:仅限肿瘤机制研究及药物筛选,不可用于临床治疗或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后加5mL培养基重悬
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁后换液
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁使细胞脱落,立即加入含血清培养基终止
注意事项:
- 避免消化时间过长(防止细胞膜损伤)
- 传代后48小时内避免频繁观察,减少机械扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤:
- 消化离心后重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→转入液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞活力(台盼蓝染色存活率≥90%)
- 功能验证:CCK - 8增殖实验(P5代细胞应保持高增殖活性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度异常导致细胞失活(需提供冷链记录)
2. 5天内证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微图像)
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未按规范进行细胞复苏(如直接室温解冻)
2. 自行更换培养基导致细胞形态异常
3. 实验操作污染(如超净台未灭菌)
4. 未在指定代次内使用细胞(超过P8代次)