一、细胞基本属性
细胞名称
HUCCT1人胆管癌细胞
细胞别称
HUCCT1细胞；人胆管癌细胞系
种属来源
人（Homo sapiens）
疾病背景
源自胆管癌患者的肿瘤组织
组织来源
胆管癌组织原代分离
生长特性
贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
细胞形态
上皮样多边形，核质比高，成簇生长
细胞代数
P5 - P15（推荐使用中低代数维持肿瘤特性）
细胞规格
1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
RPMI - 1640（含10% FBS+1%双抗）
培养条件
气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及胎牛血清替代物），液氮长期保存
倍增时间
约36 - 48小时（与培养基营养成分相关）
应用范围
肿瘤机制研究、药物敏感性测试、侵袭转移模型构建
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴轻柔摇晃解冻，离心去冻存液后重悬接种
培养瓶：酒精消毒表面，静置4小时待细胞贴壁后换液
传代标准
融合度达80% - 90%（建议每周传代2次）
传代比例
1:3至1:6（依据实验需求调整接种密度）
消化方法
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
避免消化过度导致细胞膜损伤
传代后6 - 8小时补充新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO+90%胎牛血清）
细胞密度
冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
离心收集对数生长期细胞
程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存
复苏验证
复苏后48小时观察贴壁率（应＞85%）
功能验证：CCK - 8检测增殖曲线（P10代内应保持活性）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 到货干冰完全挥发且细胞存活率＜80%
2. 7日内经STR鉴定显示交叉污染
3. 支原体检测阳性（需提供第三方报告）
不予重发情形
1. 未使用原代冻存液进行复苏操作
2. 擅自改用无血清培养基培养超过3代
3. 未定期进行支原体污染监测
4. 超说明书代数范围继续扩增导致特性改变
