一、细胞基本属性
细胞名称:HTR-8/SVneo人绒毛膜滋养层细胞
细胞别称:绒毛膜滋养层细胞、胎盘滋养层细胞、HTR8细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康妊娠早期女性(供体筛查无妊娠并发症史)
组织来源:胎盘绒毛膜组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样或多角形,融合后呈铺路石样单层
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,确保功能稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:DMEM/F12培养基(含10%胎牛血清+1%滋养层细胞生长添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无蛋白冻存液(含5% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约48 - 72小时(受血清批次及传代密度影响)
供应限制:仅用于基础研究,禁止临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后转移至15mL离心管,加5mL预温培养基离心去冻存液
- 培养瓶:酒精消毒后静置于CO₂培养箱4小时再换液
传代标准:融合度达80% - 90%(高密度易诱发分化)
传代比例:1:3至1:5(建议接种密度3×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁使细胞脱落
注意事项:
- 首次传代需保留原代培养基50%体积
- 每两周进行支原体检测(建议采用PCR法)
- 避免频繁换液(维持自分泌生长因子浓度)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含7.5% DMSO+10%海藻糖)
细胞密度:1.5×10^6 - 2×10^6 cells/mL(高密度冻存可提升复苏率)
冻存步骤:
- 消化后细胞悬液4℃预冷10分钟
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 12h → 液氮储存
复苏验证:
- 台盼蓝染色存活率≥85%(需排除机械损伤细胞)
- 功能验证:细胞迁移实验(Transwell法检测侵袭能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 液氮运输罐真空失效导致细胞失活(需提供温度记录曲线)
2. 5日内确认真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. STR位点匹配率<95%(需提供客户测序原始数据)
4. 细胞贴壁率低于70%(提供复苏后24小时显微照片)
免责条款:
1. 使用非指定培养基导致表型改变(如EMT转化)
2. 未按要求进行胶原包被引发细胞脱落
3. 长期传代超过P20导致的遗传漂移
4. 未执行标准复苏流程造成的冰晶损伤
(注:本产品需配合胎盘组织专用培养体系使用,建议首次实验设置阴阳性对照组。细胞特性可能受妊娠供体个体差异影响,功能性实验需重复验证。)