一、细胞基本属性
- 细胞名称：HT - 29人结肠癌细胞
- 细胞别称：HT29；人结直肠腺癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：44岁女性结肠腺癌患者
- 组织来源：结肠腺癌组织
- 生长特性：贴壁生长（需基质蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样，贴壁后呈多角形或铺路石样排列
- 细胞代数：P3 - P10（推荐使用代数，确保遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清冻存液）
- 培养基：McCoy's 5A培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（含10% DMSO及保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（依赖培养密度及传代处理）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体外诊断
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭外壁，静置培养箱4小时平衡后换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每3 - 4天传代）
- 传代比例：1:3至1:6（依据实验需求调整接种密度）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化完成后立即加入含血清培养基终止反应
- 避免频繁观察干扰贴壁，传代后48小时内勿换液
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞活力（台盼蓝染色存活率≥90%）
- 功能验证：CCK - 8法检测增殖曲线（P5代细胞应符合标准生长速率）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测证据）
- 细胞复苏后存活率低于85%（需提供台盼蓝染色结果）
- STR基因分型与数据库不匹配
- 不予重发情形：
- 未按规范进行预温培养基直接复苏细胞
- 使用非指定培养基导致形态异常或污染
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染
- 液氮保存不当导致冻存管破裂
