一、细胞基本属性
- 细胞名称：HSF(SV40)人真皮成纤维细胞（永生化）
- 细胞别称：HSF细胞；SV40永生化人皮肤成纤维细胞；真皮成纤维细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无皮肤疾病或异常增生史）
- 组织来源：真皮层组织（经胶原酶消化分离）
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞贴壁基质，如明胶包被）
- 细胞形态：长梭形或纺锤形，增殖期呈放射状排列，融合后呈致密单层
- 细胞代数：P3 - P10（经SV40 Large T抗原永生化处理，遗传稳定性高）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS+SV40永生化维持添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（受培养密度及血清批次影响）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗、药物生产或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用试剂：0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 操作：37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞间隙增大后立即终止
- 注意事项
- 避免消化时间过长（防止细胞膜损伤）
- 首次传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及糖原保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时检测细胞存活率（台盼蓝染色法，存活率≥90%）
- 功能验证：SV40 Large T抗原表达检测（免疫荧光法确认永生化特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞死亡（需提供温度记录证明）
- 收货后3天内证实支原体污染（需提供PCR检测报告）
- 细胞复苏后活力低于85%（需提供台盼蓝染色结果）
- STR分型与数据库记录不一致
- 不予重发情形
- 客户未按推荐培养基培养导致细胞异常
- 冻存管反复冻融超过2次
- 未在72小时内完成细胞复苏操作
- 自行修改培养条件导致功能丧失
