一、细胞基本属性
细胞名称:人胰腺癌细胞(Human Pancreatic Adenocarcinoma Cells)
细胞别称:HPAC;胰腺导管腺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年患者(原代来源为胰腺癌组织,临床信息保密)
组织来源:胰腺癌原发灶组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样多角形,高核质比,成片生长后呈现铺路石样排列
细胞代数:P4 - P10(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养基批次及接种密度相关)
供应限制:仅限体外研究,不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻后离心去冻存液,加5mL预热培养基重悬
培养瓶:酒精擦拭外壁后静置培养箱4小时再换液
传代标准:融合度达80 - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
需预先包被I型胶原蛋白增强贴壁效率
传代后12小时内避免移动培养瓶以防机械损伤
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
消化后离心收集细胞,冻存液重悬分装至冻存管
程序降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 液氮长期存储
复苏验证:
台盼蓝染色存活率≥90%(需在解冻后6小时内检测)
功能验证:CA19 - 9分泌量检测(P5代细胞应维持肿瘤标志物表达)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输中温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
2. 5日内证实支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(按标准流程检测)
4. STR分型与数据库记录不符
不予重发情形:
1. 收到细胞后未及时传代导致过度老化
2. 自行更改培养基配方影响细胞特性
3. 未使用推荐包被基质导致贴壁失败
4. 未按规程进行定期支原体检测