一、细胞基本属性
- 细胞名称:人肾上皮细胞(Human Renal Epithelial Cells)
- 细胞别称:HKb-20;肾皮质上皮细胞;肾小管上皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
- 组织来源:肾皮质组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型多角形单层,接触抑制后呈铺路石样排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Renial Epithelial Cell Medium(含1% FBS+表皮生长因子及转铁蛋白)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及低温保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 60小时(依赖培养密度及基质条件)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀离心重悬。
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱2小时,待温度平衡后换液。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:4(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含钙离子螯合剂)。
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项:
- 避免消化时间过长(防止细胞膜完整性受损)。
- 传代后12小时内更换培养基以清除残余消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及海藻糖保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重振于冻存液,分装至冻存管。
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证:
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色法,存活率≥90%)。
- 功能验证:细胞贴壁率检测(P5代细胞贴壁率应>85%)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 5日内证实微生物污染(需提供污染检测报告)。
- 细胞复苏存活率低于90%(经第三方检测确认)。
- 细胞STR谱系与数据库不匹配。
- 不予重发情形:
- 客户未在48小时内启动复苏流程。
- 使用非指定培养基导致细胞功能异常。
- 自行修改冻存程序引发细胞损伤。
- 未按规范进行污染排查直接实验。