一、细胞基本属性
- 细胞名称：HGC - 27+YFP人胃癌细胞（黄色荧光标记株）
- 细胞别称：HGC - 27 - YFP；荧光标记胃癌细胞；YFP标记胃癌细胞株
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 病理背景：胃癌患者（原代细胞来源，经永生化处理）
- 组织来源：胃组织（经病理学确认的胃腺癌组织）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样，单层贴壁呈不规则多边形，YFP荧光稳定表达
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数，确保荧光蛋白表达稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含YFP维持培养基）
- 培养基：RPMI - 1640基础培养基（含10% FBS + 1%双抗+ 200μg/mL G418维持荧光标记）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及荧光蛋白保护剂），液氮长期保存
- 荧光特性：YFP稳定表达（Ex/Em = 513/527nm），需避光操作
- 供应限制：仅限细胞机制研究，禁止临床治疗或转基因生物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置4小时后换液培养
- 传代标准：融合度达90% - 95%（建议每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用试剂：使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 消化时间及观察：37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 荧光维持
- 传代操作：传代时持续添加G418（终浓度200μg/mL）
- 观察光源：避免长时间蓝光照射（建议使用低强度白光观察）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 40%基础培养基+ 50% FBS）
- 冻存密度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL（保证复苏后荧光强度）
- 冻存流程
- 处理步骤：消化后细胞离心去上清，轻柔重悬于冻存液
- 降温过程：程序降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存
- 质控标准
- 复苏存活率：复苏存活率≥95%（台盼蓝染色验证）
- 荧光表达率：荧光表达率≥98%（流式细胞术检测）
四、售后服务承诺
- 重发条款
- 运输干冰耗尽：运输过程干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- YFP阳性率低：到货72小时内经流式检测证实YFP阳性率＜95%
- 支原体污染：支原体污染（需提供第三方检测报告）
- STR分型不匹配：STR分型与数据库不匹配
- 免责情形
- G418浓度未维持：未按推荐条件维持G418浓度导致荧光丢失
- 强光照射：使用强光源长时间照射造成光漂白
- 液氮储存中断：液氮储存中断超过24小时
- 遗传漂移：超过P15代次后出现的遗传漂移
