一、细胞基本属性
- 细胞名称：HFF-1人皮肤成纤维细胞（Human Skin Fibroblast Cell Line HFF-1）
- 细胞别称：皮肤成纤维细胞；人真皮成纤维细胞；HFF1
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无遗传性疾病史）
- 组织来源：新生儿包皮组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质黏附）
- 细胞形态：典型长梭形或多角形，单层排列呈网状结构
- 细胞代数：P3 - P8（保证细胞增殖活性与功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖培养密度与血清浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或生物医学工程产品开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面后静置培养箱平衡2小时
- 传代标准：细胞融合度达80%-90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin-EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液）
- 37℃消化30 - 60秒，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化后需完全中和酶活性（避免残留损伤细胞膜）
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护蛋白）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时内检测细胞贴壁率（应≥90%）
- 功能验证：胶原分泌检测（P5代细胞应维持正常分泌功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 物流温度异常导致细胞失活（需提供温度记录凭证）
- 到货3日内证实微生物污染（需提供污染检测报告）
- 细胞复苏后存活率低于85%（台盼蓝染色法）
- 细胞STR谱系与数据库不匹配
- 不予重发情形：
- 客户超时复苏（超过推荐72小时窗口期）
- 自行更换培养基导致细胞功能异常
- 实验操作不当引起的细胞损伤（如机械刮擦）
- 未按标准流程进行细胞传代与冻存
