一、细胞基本属性
- 细胞名称:HEY人卵巢癌细胞(HEY Human Ovarian Cancer Cells)
- 细胞别称:HEY细胞;卵巢透明细胞癌
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年女性(源自卵巢透明细胞癌患者)
- 组织来源:卵巢癌组织原代分离
- 生长特性:贴壁生长(依赖基底膜基质支持)
- 细胞形态:上皮样,多角形或梭形,核质比高
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用中低代数以维持肿瘤特性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS + 1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(高增殖活性,受培养密度影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基混匀离心后重悬接种
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(高增殖细胞建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即加入含血清培养基终止
- 注意事项:
- 避免过度消化导致细胞成团或膜损伤
- 传代后12小时更换培养基以清除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(要求≥90%)
- 功能验证:Transwell侵袭实验(P8代细胞应保持高侵袭特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 到货3天内证实支原体/细菌污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
- STR鉴定与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非推荐培养基或添加未经验证的生长因子
- 反复冻融或不当操作导致细胞损伤
- 未按要求进行定期支原体检测