一、细胞基本属性
- 细胞名称:HEPG2人肝癌细胞
- 细胞别称:HEPG2;Hep G2;人肝癌细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自15岁白人男性肝母细胞瘤患者的肝癌组织
- 组织来源:肝组织肿瘤病灶(分化程度中等)
- 生长特性:贴壁生长(可形成致密单层或局部重叠生长)
- 细胞形态:上皮样多角形,核质比高,胞质颗粒明显
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用代数范围内以确保功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖血清浓度及传代密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭外壁,静置培养箱4小时后再操作
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 避免消化过度(防止细胞膜损伤)
- 传代后需间隔48小时再进行后续实验(确保贴壁稳定)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 转入液氮
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:AFP分泌检测(P8代细胞应维持肝癌标志物表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 7天内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(经第三方检测确认)
- STR鉴定与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 客户未按推荐培养基培养导致形态异常
- 反复冻融或长期超代次使用(P15以上)
- 实验污染后未及时反馈(超过10个工作日)
- 未进行预适应直接用于动物模型构建