一、细胞基本属性
细胞名称
Hep3B2.1-7 [Hep3B]人肝癌细胞
细胞别称
Hep3B;人肝癌细胞;肝癌细胞系
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
男性肝癌患者(原代取材于肝癌组织)
组织来源
肝脏肿瘤组织
生长特性
贴壁生长(依赖贴壁基质表面)
细胞形态
上皮样,单层贴壁呈不规则多边形
细胞代数
P3 - P10(建议控制代数以维持表型稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
DMEM高糖培养基(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间
约24 - 48小时(依赖培养条件及传代密度)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精消毒表面后直接置于培养箱平衡2小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
37℃消化2 - 3分钟,细胞边缘卷曲后轻柔拍打终止
注意事项
避免消化过度(防止膜蛋白损伤)
传代后6小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
冻存步骤
消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证
复苏后24小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)
功能验证:甲胎蛋白(AFP)分泌检测(P5代细胞应保持分泌特性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货3天内经检测证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 复苏后细胞存活率低于90%(需提供台盼蓝染色影像)
4. STR分型与数据库记录不匹配
不予重发情形
1. 收货后未按规范储存或超72小时未复苏
2. 使用非指定培养基导致细胞功能异常
3. 反复冻融或机械损伤导致细胞死亡
4. 未进行STR鉴定前已开展后续实验