一、细胞基本属性
- 细胞名称：HeLa.S3人宫颈癌细胞
- 细胞别称：HeLa - S3；宫颈癌上皮细胞；HeLa亚克隆S3
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 背景来源：源自Henrietta Lacks宫颈腺癌组织，经亚克隆筛选获得S3亚系
- 组织来源：宫颈癌组织
- 生长特性：贴壁生长（无需特殊基质包被）
- 细胞形态：上皮样，贴壁后呈不规则多边形，核质比高
- 细胞代数：P15 - P25（建议使用代数内保证增殖活性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含胎牛血清冻存液）
- 培养基：MEM培养基（含10% FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：胎牛血清冻存液（含10% DMSO），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 36小时（与培养基批次及传代密度相关）
- 供应限制：仅限科研用途，禁止临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，直接置于CO₂培养箱静置4小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:4至1:6（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 避免消化过度（HeLa.S3易成团聚集）
- 传代后48小时需更换培养基以清除代谢废物
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞，重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → -80℃ 24h → 转入液氮
- 复苏验证
- 复苏后12小时检测贴壁率（应≥85%）
- 增殖验证：连续培养3代需恢复标准倍增时间
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度记录异常导致细胞死亡（需提供温度记录仪数据）
- 到货7天内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
- 复苏后贴壁率低于80%（需提供显微成像证据）
- STR分型与ATCC数据库不一致
- 不予重发情形
- 未使用指定培养基导致细胞形态异常
- 反复冻融或超低温保存不规范
- 未按规范进行支原体清除直接传代
- 收货后超过5个工作日未进行复苏操作
（注：所有操作需符合生物安全二级实验室规范，建议定期进行STR鉴定及支原体检测）
