一、细胞基本属性
细胞名称:人食管上皮细胞(Human Esophageal Epithelial Cells)
细胞别称:HET - 1A;食管上皮细胞;食道上皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无食管病变史)
组织来源:食管组织上皮层
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质支持)
细胞形态:典型单层铺路石状,接触抑制后呈现规则多角形
细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性和遗传一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:Epithelial Cell Medium(含10% FBS+上皮细胞生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约48 - 72小时(受培养密度及培养基批次影响)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床治疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱平衡2小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含钙镁离子平衡液)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
- 避免消化时间过长(防止细胞膜完整性受损)
- 传代后6 - 8小时更换新鲜培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期存储
复苏验证:
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色法≥90%)
- 功能验证:细胞角蛋白免疫荧光染色(P5代细胞应维持上皮特异性标记表达)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 收到后72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 复苏存活率低于90%(需提供染色检测图像)
4. 细胞STR鉴定与备案数据不符
不予重发情形:
1. 用户未在48小时内完成复苏操作
2. 擅自更换非指定培养基导致功能异常
3. 未按规范进行细胞传代造成污染
4. 实验操作不当导致细胞特性改变(如分化诱导)
(注:所有操作需符合生物安全规范,建议定期进行支原体检测)