一、细胞基本属性
- 细胞名称:HELA+LUC人宫颈癌细胞荧光素酶标记
- 细胞别称:HELA - LUC;宫颈癌细胞荧光素酶报告株
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:宫颈癌组织(经病理学确诊的腺癌组织)
- 荧光标记:稳定整合荧光素酶基因(Luciferase),需定期添加嘌呤霉素维持筛选
- 生长特性:贴壁生长(依赖胰酶消化传代)
- 细胞形态:上皮样细胞,贴壁后呈不规则多边形,核质比高
- 细胞代数:P15 - P25(传代次数可控,保证荧光素酶信号稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10%胎牛血清+1%双抗+2μg/mL嘌呤霉素)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 荧光素酶活性:≥5×10^4 RLU/μg蛋白(使用荧光素酶检测试剂盒验证)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内外诊断
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于CO₂培养箱
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:4至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA消化液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 传代后48小时内添加嘌呤霉素维持筛选压力
- 避免频繁换液导致荧光素酶信号衰减
- 定期检测支原体污染(每3个月一次)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%培养基)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测荧光素酶活性(活细胞率≥85%)
- 功能验证:活体成像实验(皮下接种后检测生物发光信号)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 7日内证实荧光素酶信号丢失(需提供原始检测数据)
- 细胞污染经第三方检测确认(需提供检测报告)
- 不予重发情形
- 未按规范添加筛选剂导致标记基因丢失
- 自行改造细胞株导致功能异常
- 复苏后培养超过一周未进行活性验证
- 未使用指定培养基或培养条件