一、细胞基本属性
细胞名称:人子宫颈癌细胞(Human Cervical Cancer Cells)
细胞别称:HELA细胞;人宫颈癌细胞;宫颈上皮样癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:31岁女性(供体为宫颈癌患者)
组织来源:宫颈癌组织
生长特性:贴壁生长(高增殖活性,无接触抑制)
细胞形态:上皮样,单层铺展时呈不规则多边形
细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数以保证遗传稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10%胎牛血清+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 36小时(高增殖速率,依赖培养密度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
• 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱4小时待细胞贴壁
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
• 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落后终止消化
注意事项:
• 消化时间需严格控制(HELA细胞易成团脱落)
• 传代后12小时建议观察贴壁情况,及时补足培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及葡萄糖缓冲体系)
细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
• 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
• 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 转入液氮长期保存
复苏验证:
• 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
• 功能验证:细胞增殖曲线检测(P5代细胞应维持指数生长期特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法复检确认)
4. STR分型与ATCC标准数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未按操作指南进行细胞复苏及传代
2. 使用非标准培养基或添加未经验证的生长因子
3. 自行反复冻融导致细胞损伤
4. 未在指定代次范围内使用细胞导致功能异常