一、细胞基本属性
细胞名称:HEK-293A人胚肾细胞
细胞别称:HEK293A;293A细胞;人胚肾细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:胚胎肾组织
生长特性:贴壁生长(依赖胰蛋白酶消化传代)
细胞形态:典型上皮样单层,贴壁后呈多角形或梭形
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以保证转染效率稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含含血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度与传代条件)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶:酒精擦拭外壁后静置培养箱平衡30分钟
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:4至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
• 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液
• 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞间隙扩大后终止
注意事项:
• 避免过度传代导致转染效率下降
• 换液时保留部分条件培养基以维持细胞状态
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:含血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤:
• 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
• 程序降温:4℃ 30min → -80℃过夜 → 转入液氮
复苏验证:
• 复苏后48小时检测贴壁率(正常应≥85%)
• 功能验证:GFP质粒转染效率检测(P8代细胞应维持>70%转染率)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞死亡(需提供温度监测数据)
2. 72小时内证实支原体污染(需提供荧光法检测报告)
3. 复苏后贴壁率低于80%(需提供培养24小时显微照片)
4. STR谱系鉴定与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 使用非标准培养基导致细胞分化
2. 未按要求进行定期支原体检测
3. 超过推荐代数仍继续扩增使用
4. 转染实验未使用阳性质控对照
(注:以上内容基于HEK - 293A细胞系通用特性编写,具体参数可能因实验室条件略有差异,建议首次使用时进行功能验证。)