一、细胞基本属性
- 细胞名称:HEK - 293人胚肾细胞(Human Embryonic Kidney 293 Cells)
- 细胞别称:293细胞;HEK293;人胚肾转化细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 来源背景:健康胚胎肾组织经腺病毒5型DNA片段转化建立
- 组织来源:胚胎肾皮质(经永生化处理)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胰酶消化传代)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁呈不规则多角形或梭形
- 细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数,确保基因表达稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮(-150℃以下)长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖传代密度及培养基条件)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或体外诊断
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱4小时稳定
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:4至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含酚红指示剂)
- 37℃消化30 - 60秒,轻拍瓶壁细胞脱落后立即终止
- 注意事项
- 避免消化过度(影响细胞膜完整性)
- 传代后6 - 8小时观察贴壁情况,24小时内勿换液
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏验证
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:48小时内完成EGFP质粒转染实验(转染效率应≥70%)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 干冰运输异常导致细胞失活(需提供温度记录证据)
- 到货3日内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测结果)
- 细胞复苏存活率低于85%
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形
- 收到细胞后超72小时未进行复苏操作
- 使用非DMEM培养基或自行修改添加剂配方
- 未按规范传代导致细胞老化或形态异常
- 液氮保存设备故障导致反复冻融
(注:本产品需配合专用培养基及标准培养条件使用,适用于基因转染、蛋白表达及病毒包装等研究领域。)