一、细胞基本属性
- 细胞名称:HCT - 8人结直肠癌细胞
- 细胞别称:HRT - 18;结肠腺癌细胞;结直肠腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:结直肠腺癌组织(原代分离自58岁男性患者)
- 生长特性:贴壁生长(需依赖细胞贴壁基质)
- 细胞形态:上皮样单层,高密度时呈铺路石样排列
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,确保遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含10% DMSO的胎牛血清冻存液,-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 60小时(依赖传代密度及培养条件)
- 供应限制:仅限科学研究,禁止临床治疗、药物开发或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱4小时平衡温湿度
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(常规每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化3 - 5分钟,镜下确认细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:避免消化过度(影响细胞膜完整性),传代后48小时内避免频繁观察扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含20%胎牛血清+10% DMSO的混合冻存液
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管,程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证:复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%),增殖能力验证需通过CCK - 8实验(P8代内增殖曲线应符合标准)
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明);2. 72小时内证实交叉污染(需提供STR比对报告);3. 复苏后存活率低于85%(需提供染色检测视频)
- 不予重发情形:1. 解冻后未按规范离心去除冻存液;2. 使用非指定培养基或血清导致形态异常;3. 未定期进行支原体检测引发污染扩散