一、细胞基本属性
- 细胞名称：HCT - 15/Taxol人结直肠癌紫杉醇耐药株
- 细胞别称：HCT - 15紫杉醇耐药株；Taxol耐药性结直肠癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：结直肠腺癌组织来源，经紫杉醇梯度浓度诱导筛选获得稳定耐药性
- 组织来源：结直肠癌组织（经病理学确认）
- 耐药特性：通过长期低剂量紫杉醇暴露诱导，耐药性稳定（IC50较亲本株提高>10倍）
- 生长特性：贴壁生长（需预包被细胞外基质）
- 细胞形态：上皮样贴壁细胞，呈多角形或梭形，接触抑制不明显
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以保证耐药表型稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640+10% FBS+1%青霉素/链霉素+0.1μM Taxol（维持耐药性）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 耐药验证：每3代需通过CCK - 8法检测紫杉醇IC50值（参考值：亲本株IC50≤5nM，耐药株IC50≥50nM）
- 供应限制：仅限肿瘤耐药机制研究，不可用于药物开发或临床相关实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后直接置于培养箱平衡2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 耐药维持：培养基中需持续添加0.1μM紫杉醇（撤药可能导致耐药性衰减）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化3 - 5分钟，机械轻拍促进脱落
- 注意事项：
- 换液前需预温含药培养基至37℃（避免温度骤变影响细胞活性）
- 耐药株生长速率较亲本株降低约30%，需密切观察形态变化
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：2×10^6 - 5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 终止消化后离心去上清，轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min→ - 20℃ 2h→ - 80℃ 24h→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 耐药性验证：复苏后首次传代需进行紫杉醇IC50检测
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常（需提供物流温度监控截图）
- 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
- STR分型与数据库记录不符（需提供第三方检测报告）
- 耐药性验证未达承诺阈值（需提交CCK - 8检测原始数据）
- 不予重发情形：
- 未按规范维持紫杉醇药物浓度导致耐药性丢失
- 使用非指定培养基培养超过3代
- 细胞污染后未及时通知且继续传代
- 液氮冻存违反梯度降温程序
注：本产品需配合亲本株HCT - 15对照使用，建议定期进行耐药基因（如ABCB1、TUBB3）表达量检测。
