一、细胞基本属性
- 细胞名称:HCT-15人结肠癌细胞
- 细胞别称:HCT15;结肠腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:源自49岁男性结肠腺癌患者
- 组织来源:结肠腺癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需依赖细胞间接触)
- 细胞形态:上皮样多角形,聚集成簇生长
- 细胞代数:P3 - P15(推荐使用P5 - P10代以维持遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI-1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度与传代处理)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于5mL预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁使细胞脱落
- 注意事项:
- 避免胰酶消化超时(可能导致细胞膜损伤)
- 传代后6小时内勿移动培养瓶以减少机械应力
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 20min → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8增殖曲线检测(P5代细胞应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 72小时内证实真菌/细菌污染(需提供染色图片)
- 细胞复苏存活率低于80%
- STR位点与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 客户未按推荐密度接种导致生长异常
- 使用非标准培养基(如未添加必需生长因子)
- 反复冻融或长期超低温保存后功能退化
- 未定期进行支原体检测引发实验偏差