一、细胞基本属性
- 细胞名称:HCT116+LUC人结肠癌细胞(荧光素酶标记)
- 细胞别称:HCT116 - LUC;荧光素酶标记结肠癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:结肠癌组织
- 生长特性:贴壁生长(上皮样,无接触抑制特性)
- 细胞形态:多角形或梭形,单层贴壁,核质比高
- 荧光标记:稳定表达Firefly Luciferase(需配合D -荧光素底物检测)
- 细胞代数:P5 - P15(经抗生素筛选保证标记稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:McCoy's 5A培养基(含10% FBS+1%双抗+2μg/mL嘌呤霉素)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 增殖特性:倍增时间约24 - 36小时(受培养密度影响)
- 应用范围:肿瘤侵袭转移研究、药物筛选、活体成像实验(需符合伦理)
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置4小时后全量换液
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含酚红指示)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 传代后24小时内避免换液以维持标记稳定性
- 定期检测荧光素酶活性(建议每月用底物验证)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖保护剂)
- 冻存密度:5×10^6 cells/mL(离心后重悬)
- 冻存程序:
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 复苏检测:
- 存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 标记验证:复苏后48小时检测荧光素酶发光值
四、售后服务承诺
- 重发条款:
- 干冰运输失效(需提供融化证据及3日内检测报告)
- 细胞污染(需提交第三方支原体检测阳性证明)
- 荧光素酶活性缺失(需提供标准底物检测数据)
- STR分型与数据库不一致
- 免责情形:
- 未使用指定浓度嘌呤霉素导致标记丢失
- 活体成像实验未取得动物伦理审批
- 反复冻融或超低温保存不规范
- 未按操作手册进行传代培养
- (注:本产品仅限科研用途,不可用于临床治疗或基因编辑研究)