一、细胞基本属性
- 细胞名称：人高转移肝癌细胞（HCC - LM3）
- 细胞别称：HCCLM3；肝癌高转移细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：原发性肝细胞癌组织（经多次肺转移筛选）
- 生长特性：贴壁生长（具有侵袭性及高转移潜能）
- 细胞形态：上皮样多角形，核质比高，成片生长时呈铺路石样排列
- 细胞代数：P10 - P20（建议使用低传代批次保证转移表型稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：高糖DMEM（含10% FBS+1%双抗+1%非必需氨基酸）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：24 - 36小时（高增殖活性，需密切监控密度）
- 供应限制：仅限肿瘤学研究，禁止用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于5mL预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒后直接置于CO₂培养箱，4小时内观察贴壁情况
- 传代标准：融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代，避免过度生长）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化1 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化终止时需添加含血清培养基完全中和
- 传代后6 - 8小时需补足培养基，避免营养缺失
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90%基础培养基）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 对数生长期收集细胞，离心后重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：Transwell侵袭实验（P15代细胞应维持高转移特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 7天内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
- 细胞STR图谱与数据库不符（需提供第三方鉴定报告）
- 不予重发情形：
- 使用非推荐培养基（如RPMI - 1640替代DMEM）
- 未按时传代导致细胞老化或分化
- 实验操作不当引发基因型漂移（如长期高密度培养）
- 未按要求进行定期支原体检测
