一、细胞基本属性:
细胞名称:人胆管细胞型肝癌细胞(Human Cholangiocellular Carcinoma Cells)
细胞别称:HCCC - 9810;胆管癌细胞;肝内胆管癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年患者(具体性别及病史信息见细胞溯源报告)
组织来源:肝脏胆管组织(经病理学确诊为胆管细胞癌)
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样,单层贴壁呈铺路石状排列
细胞代数:P3 - P10(经STR鉴定确认遗传稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗+10mM HEPES缓冲液)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞复苏增强剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养基批次及接种密度相关)
供应限制:仅限科研用途,禁止临床治疗或商业用途
二、细胞培养操作指南:
收货处理:
冻存管:37℃水浴解冻后转移至15mL离心管,加入5mL预热培养基离心去冻存液
培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于CO₂培养箱,静置4小时再换液
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:4(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
消化终止需加入含血清培养基(比例≥1:1)
传代后48小时内避免频繁观察,减少扰动
三、细胞冻存操作规范:
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:推荐冻存浓度5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
细胞悬液与冻存液按1:1体积混合
程序降温:4℃平衡30分钟→异丙醇冻存盒 - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证:
存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能验证:CCK - 8检测24小时贴壁率需>90%
四、售后服务承诺:
重发标准:
1. 干冰运输中温度记录异常(需提供物流温度监测截图)
2. 到货72小时内证实真菌/细菌污染(需提供染色镜检照片)
3. STR位点匹配率<80%(以国际细胞库数据为基准)
不予重发情形:
1. 未使用原代冻存液进行复苏操作
2. 擅自使用3D培养体系导致细胞特性改变
3. 超过推荐代数(P10)后出现的功能异常
4. 未按说明书进行胶原包被导致的贴壁失败