一、细胞基本属性
- 细胞名称：HCC827+LUC人非小细胞肺癌细胞荧光素酶标记株
- 细胞别称：HCC827 - LUC；Luc - HCC827；荧光素酶标记肺腺癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 背景信息：源自女性肺腺癌患者胸腔积液，经慢病毒转导稳定表达萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase）
- 组织来源：肺腺癌组织（经病理学确认）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样，贴壁后呈铺路石状紧密排列
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用P10代以内以维持荧光素酶活性稳定）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640（含10% FBS+1%双抗+300μg/mL G418维持筛选压力）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及荧光素酶活性保护剂），液氮长期保存
- 荧光信号：体外检测限：≥50 cells/孔（96孔板）；活体成像灵敏度：≤1×10³ cells/小鼠
- 供应限制：仅限肿瘤机制研究及药物筛选，禁止临床治疗或基因编辑实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶：酒精擦拭表面后静置培养箱4小时，保留原培养基平衡
- 传代标准：融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:6（最低接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶）；37℃消化3 - 5分钟，离心后完全去除消化液
- 荧光维持：每代需添加G418维持筛选压力；建议每月进行生物发光成像验证荧光素酶活性
- 注意事项：避免反复离心损伤荧光素酶表达；传代后48小时内禁止药物处理实验
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+10%海藻糖）
- 冻存密度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL（高密度冻存可降低复苏损伤）
- 冻存步骤：消化后离心去除培养基残留；程序降温：4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
- 质量检测：复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）；荧光素酶活性检测：化学发光法RLU值≥1×10⁷/10⁴ cells；定期STR鉴定及支原体检测（每季度更新报告）
四、售后服务承诺
- 重发标准：到货干冰完全融化且细胞活性＜80%；7日内经流式检测证实荧光素酶表达率＜95%；STR位点匹配率＜85%；细胞污染经第三方检测证实
- 除外条款：未持续使用G418导致荧光素酶表达丢失；活体成像时细胞注射量超过5×10⁶ cells/点位；自行采用脂质体转染等基因操作；液氮保存中断超过24小时
