一、细胞基本属性
细胞名称:人乳腺癌细胞(HCC1937)
细胞别称:HCC1937细胞;乳腺导管癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:36岁女性原发性乳腺导管癌患者
组织来源:乳腺导管癌组织
生长特性:贴壁生长(需基质胶包被培养器皿)
细胞形态:不规则梭形或多边形,核质比高
细胞代数:P4 - P10(建议使用前完成STR鉴定)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗+1mM丙酮酸钠)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(受培养基批次影响)
基因特征:BRCA1 5382insC纯合突变,p53野生型
供应限制:仅供肿瘤机制研究,禁止临床治疗或生物制药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后,1500rpm离心3分钟去除冻存液
- 培养瓶:酒精消毒后静置4小时再换液
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每周传代1 - 2次)
传代比例:1:3至1:4(最低接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使脱落
注意事项:
- 基质胶包被需提前12小时完成(浓度2μg/cm²)
- 传代后48小时内避免频繁观察,减少机械扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无蛋白冻存液(含10% DMSO+葡萄糖缓冲体系)
细胞密度:建议1×10^6 cells/mL(不低于5×10^5 cells/mL)
冻存步骤:
- 预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后平衡30分钟
- 程序降温:4℃→ - 80℃(降温速率 - 1℃/min)→液氮转移
复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(需含5% DMSO的复苏培养基)
- 功能验证:软琼脂克隆形成实验(P8代应保持致瘤特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 液氮运输罐真空失效导致细胞失活(需提供温度记录)
2. 72小时内证实真菌污染(需提供镜检图像)
3. STR分型与ATCC数据库不一致(需提供完整电泳图)
4. BRCA1基因测序结果异常
不予重发情形:
1. 未使用推荐浓度的基质胶导致贴壁失败
2. 擅自添加生长因子改变细胞特性
3. 未进行支原体清除直接用于动物模型构建
4. 超过建议代数仍要求性能保证
(注:所有操作需在二级生物安全柜内完成,建议定期进行染色体核型分析)