一、细胞基本属性
- 细胞名称：HBE135 - E6E7人支气管上皮细胞（Human Bronchial Epithelial Cells）
- 细胞别称：HBE细胞；支气管上皮细胞；永生化支气管上皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无呼吸道疾病史）
- 组织来源：支气管组织上皮层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：铺路石样单层结构，接触抑制后呈多角形或扁平状
- 细胞代数：P3 - P8（经E6/E7基因永生化处理，维持增殖稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Bronchial Epithelial Cell Medium（含2% FBS + 上皮细胞特异性生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（依赖细胞密度与培养条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 4天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.05% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免消化时间过长（防止基底膜蛋白降解）
- 传代后24小时内更换培养基以清除残余消化液
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%为合格）
- 功能验证：免疫荧光检测角蛋白表达（P5代细胞应保持上皮标志物阳性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供温度记录凭证）
- 3个工作日内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测报告）
- 细胞复苏存活率低于90%（台盼蓝染色法复检确认）
- STR分型与产品描述不符
- 不予重发情形：
- 客户未在72小时内按规范复苏细胞
- 使用非指定培养基导致细胞功能异常
- 自行反复冻融造成细胞损伤
- 未按操作指南进行污染排查即开展实验
