一、细胞基本属性
- 细胞名称：人永生化表皮细胞（Human Immortalized Epidermal Keratinocytes）
- 细胞别称：HaCaT细胞；永生化表皮角质形成细胞；皮肤表皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 细胞特性：经HPV16 E6/E7基因永生化处理，保留表皮细胞分化潜能
- 组织来源：成人皮肤表皮组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：典型多角形或铺路石样单层，接触抑制后呈紧密镶嵌排列
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数，确保功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：表皮细胞专用培养基（含低血清、表皮生长因子及钙离子调节成分）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， -150℃以下长期保存
- 增殖能力：倍增时间约24 - 48小时（依赖培养密度及生长因子补充）
- 应用范围：仅限科研用途，适用于皮肤屏障研究、药物透皮实验及炎症机制探究
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱1小时适应
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞完全脱落
- 关键注意
- 避免消化过度（损伤细胞膜完整性）
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO、20%胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 质控检测
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：细胞划痕实验（P8代细胞应保持正常迁移能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常（需提供物流温度记录凭证）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
- 细胞复苏后存活率低于85%
- 细胞STR谱系与数据库不匹配
- 免责情形
- 客户超时复苏（超过到货72小时）
- 使用非指定培养基导致细胞分化异常
- 未按规范进行传代（如机械刮除法替代酶消化）
- 实验操作污染未及时反馈
