一、细胞基本属性
细胞名称H9/HTLV - IIIB人T淋巴瘤白血病细胞
细胞别称H9细胞;HTLV - IIIB感染T细胞系
种属来源人(Homo sapiens)
背景特征源自成人T淋巴细胞白血病患者外周血,经HTLV - IIIB病毒转化
组织来源外周血T淋巴细胞
生长特性悬浮生长(可形成细胞聚集体)
细胞形态圆形或类圆形,悬浮状态下呈单个或簇状分布
细胞代数建议使用P5 - P15代(确保病毒基因稳定性)
细胞规格1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基RPMI 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件含10% DMSO的胎牛血清冻存液, - 150℃以下长期保存
倍增时间~24 - 48小时(依赖培养密度与病毒载量)
供应限制仅限科研用途,不可用于临床治疗或人体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理冻存管:37℃水浴快速解冻,直接转移至含5mL培养基的离心管,1000rpm离心5分钟,弃上清后重悬接种;培养瓶:观察细胞密度,若超过2×10^6 cells/mL需立即传代
传代标准细胞密度达1×10^6 - 2×10^6 cells/mL(建议每2 - 3天传代)
传代比例1:2至1:4(根据实验需求调整接种密度)
传代方法无需消化:直接离心收集细胞,重悬于新鲜培养基分瓶培养;聚集体处理:可轻柔吹打或使用40μm滤网过滤分散
注意事项保持细胞密度不低于5×10^5 cells/mL(避免过度稀释导致凋亡);定期检测HTLV - IIIB病毒基因表达(建议每3代进行RT - PCR验证)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方90%完全培养基+10% DMSO
细胞密度冻存浓度:1×10^7 cells/mL
冻存步骤离心收集细胞,重悬于预冷冻存液;程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 转入液氮气相长期保存
复苏验证复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法);功能验证:CD4受体表达检测(流式细胞术)及病毒复制能力测试
四、售后服务承诺
重发标准1. 运输过程中温度记录异常导致细胞死亡(需提供物流温度追踪报告);2. 5日内证实支原体/细菌污染(需提供第三方检测报告);3. 细胞复苏后病毒基因缺失(需提供测序比对结果);4. STR鉴定与数据库不匹配
不予重发情形1. 使用非推荐培养基(如贴壁细胞专用培养基);2. 未定期检测病毒载量导致实验数据异常;3. 细胞储存于 - 20℃或反复冻融;4. 未按生物安全等级(BSL - 2)操作引发污染