一、细胞基本属性
细胞名称：GS-HEPG2人肝癌细胞亚型（过表达谷氨酰胺合成酶）
细胞别称：HEPG2 - GS；过表达GS肝癌细胞；HEPG2 - Glutamine Synthetase
种属来源：人（Homo sapiens）
疾病背景：肝癌细胞系HEPG2衍生亚型（经基因工程改造稳定过表达谷氨酰胺合成酶）
组织来源：肝脏组织（原代肝癌细胞基因编辑后建系）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：上皮样，单层贴壁，高表达GS的细胞体积略增大
细胞代数：P5 - P10（建议使用前验证GS表达稳定性）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+2mM谷氨酰胺+1%丙酮酸钠）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~24 - 48小时（GS过表达加速谷氨酰胺代谢循环）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或商业开发
二、细胞培养操作指南
收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基；培养瓶：75%酒精表面消毒后直接置于培养箱
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA），37℃消化1 - 2分钟，终止时加入含血清培养基
注意事项：避免频繁传代导致GS表达水平下降；传代后12小时内补充2mM谷氨酰胺
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 3×10^6 cells/mL
冻存步骤：离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液；程序降温：4℃ 30min → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证：复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）；功能验证：qPCR检测GS基因表达量（需高于亲本HEPG2三倍以上）
四、售后服务承诺
重发标准：1. 干冰运输失效导致细胞死亡（需提供融化状态证明）；2. 72小时内证实支原体污染（需提供检测报告）；3. GS表达量未达标准（需提供qPCR数据）
不予重发情形：1. 使用非指定培养基导致GS表达沉默；2. 未按要求进行胶原蛋白包被培养；3. 细胞传代超过P10后功能异常；4. 未定期检测GS表达稳定性
