一、细胞基本属性
细胞名称:EJ - 1人膀胱癌细胞(Human Bladder Cancer Cell Line EJ - 1)
细胞别称:EJ - 1;膀胱癌上皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:膀胱移行细胞癌组织
生长特性:贴壁生长(具有快速增殖特性)
细胞形态:上皮样多边形,核质比高,成片状聚集
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以确保遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO+细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(依赖传代密度及培养条件)
供应限制:仅用于肿瘤机制研究或药物筛选实验,不可用于临床
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管复苏:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶处理:75%酒精表面消毒后直接入培养箱静置4小时
传代标准:融合度达80% - 90%时传代(建议每2 - 3天进行)
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,显微镜观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项:消化后需完全中和胰酶,首次传代后建议48小时内更换培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:梯度降温程序:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证:台盼蓝染色存活率≥90%,复苏后需通过CCK - 8法验证增殖活性
四、售后服务承诺
重发标准:1. 物流温度记录异常导致细胞死亡(需提供运输温度曲线);2. 到货72小时内经检测证实支原体污染(需提供检测报告);3. STR分型与数据库记录不符(需提供完整电泳图谱)
不予重发情形:1. 客户未按推荐培养基进行培养;2. 细胞冻存超过推荐代数(P15)后出现异常;3. 未执行标准传代操作导致污染;4. 用于基因编辑后产生的遗传漂移