一、细胞基本属性
细胞名称：ECV-304人膀胱癌细胞
细胞别称：ECV304细胞、人膀胱移行细胞癌细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：成年女性（源自膀胱移行细胞癌患者）
组织来源：膀胱移行上皮癌组织
生长特性：贴壁生长（依赖贴壁基质）
细胞形态：上皮样，单层贴壁，呈不规则多边形或梭形
细胞代数：P5 - P15（建议使用代数内以保证增殖活性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM培养基（含10% FBS+1%双抗）
培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~24 - 36小时（依赖传代密度及培养基状态）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
• 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶：酒精擦拭外表面，静置培养箱1小时适应环境
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
• 使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液
• 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项：
• 消化终止时需加入含血清培养基充分中和
• 传代后48小时内避免频繁观察，减少环境扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及糖原保护剂）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
• 离心收集对数生长期细胞，缓慢加入冻存液混匀
• 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证：
• 复苏后24小时检测贴壁率（应≥85%）
• 功能验证：CCK - 8法检测增殖曲线（P8代内增殖速率应保持稳定）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 干冰运输中温度异常导致细胞失活（需提供温度记录证明）
2. 到货72小时内证实真菌/细菌污染（需提供污染检测证据）
3. 复苏后贴壁率低于80%（需提供清晰显微照片）
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形：
1. 未按推荐方法进行传代导致细胞老化
2. 使用非标准培养基或血清导致功能异常
3. 液氮保存设备故障引发的反复冻融
4. 未在P15代以内使用导致的数据偏差
