一、细胞基本属性
- 细胞名称:Eca - 109人食管癌细胞
- 细胞别称:Eca - 109;食管癌细胞系;人食管鳞状细胞癌
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年患者(具体性别不详,经病理确诊为食管鳞状细胞癌)
- 组织来源:食管癌组织(原代取材于食管鳞状细胞癌病灶)
- 生长特性:贴壁生长(需依赖细胞外基质支持)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁呈铺路石状排列,接触抑制不明显
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,确保基因组稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(-196℃)
- 倍增时间:约24 - 48小时(受培养密度及血清浓度影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗、药物研发或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶:75%酒精表面消毒,静置于培养箱2小时待细胞贴壁
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA),37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁使细胞脱落,立即加入含血清培养基终止
- 注意事项:避免消化时间过长(防止细胞膜损伤);传代后6小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%基础培养基)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:消化收集细胞,离心后重悬于预冷冻存液;分装至冻存管,按程序降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 转移至液氮
- 复苏验证:复苏后48小时内检测细胞活性(台盼蓝拒染率≥90%);功能验证:CCK - 8增殖实验(P8代细胞应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 物流温度记录异常导致细胞死亡(需提供运输温度曲线);2. 到货5天内证实微生物污染(需提供污染检测证据);3. 复苏后细胞存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像);4. STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形:1. 未按规范进行离心去冻存液导致渗透压损伤;2. 使用非指定培养基(如DMEM)培养导致形态异常;3. 未定期进行支原体检测引发交叉污染;4. 细胞培养超过推荐代数(P15)后出现异常