一、细胞基本属性
- 细胞名称：人前列腺癌细胞（DU145）
- 细胞别称：DU - 145；前列腺癌脑转移细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：源自前列腺癌脑转移病灶（成年男性患者）
- 组织来源：前列腺癌转移脑组织（经病理学确认）
- 生长特性：贴壁生长（需细胞外基质支持）
- 细胞形态：上皮样不规则多角形，部分呈圆形，低接触抑制特性
- 细胞代数：P3 - P8（推荐使用代数，确保基因表达稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640基础培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存（-150℃以下）
- 倍增时间：约48小时（密度依赖性，高密度时延长）
- 应用范围：肿瘤侵袭转移机制研究、药物敏感性测试（仅限科研用途）
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴解冻后转移至含5mL培养基的离心管，1000rpm离心3分钟，弃上清后重悬接种
- 培养瓶：酒精擦拭表面，静置培养箱4小时待细胞贴壁后换液
- 传代标准：融合度达80% - 90%（贴壁紧密时需及时传代）
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落，加入含血清培养基终止
- 注意事项
- 消化后需完全中和胰酶，残留酶液易导致聚团
- 传代后48小时内避免频繁观察，减少物理扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 5×10^6 cells/mL（高密度提升复苏效率）
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于预冷冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：CCK - 8检测增殖曲线（P5代细胞应保持对数生长期特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致干冰耗尽（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
- 细胞复苏存活率＜85%（需提供染色图片及计数数据）
- STR分型与ATCC标准数据库不符
- 免责条款
- 客户未按规范使用胎牛血清或添加不明生长因子
- 解冻后存放超48小时未接种
- 实验过程中交叉污染（如与HeLa细胞共培养）
- 液氮保存中断导致反复冻融
