一、细胞基本属性
- 细胞名称：DLD - 1人结直肠腺癌细胞
- 细胞别称：DLD - 1细胞；结直肠腺癌细胞；结肠癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：源自72岁白人男性结直肠腺癌患者的淋巴结转移灶
- 组织来源：结直肠腺癌组织（中分化腺癌，具微卫星不稳定性）
- 生长特性：贴壁生长（部分细胞呈半悬浮状态）
- 细胞形态：上皮样多角形，核质比高，成簇生长
- 细胞代数：建议使用P5 - P15代（维持基因组稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清型冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640（含10%FBS + 1%丙酮酸钠+2mM L -谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5%CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：程序降温冻存液（含10%DMSO及胎牛血清），液氮长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（与培养基血清浓度正相关）
- 供应限制：仅限肿瘤机制研究，不可用于药物开发或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴解冻后，1200rpm离心2分钟去除冻存液
- 培养瓶：酒精消毒后直接置于CO₂培养箱平衡
- 传代标准：融合度达80% - 90%（贴壁细胞出现重叠生长时需及时传代）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 半悬浮细胞需离心回收
- 建议每周传代2 - 3次维持对数生长期
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：完全培养基与DMSO按9:1体积比新鲜配制
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后细胞悬液300g离心5分钟
- 按梯度降温程序：4℃30min→ - 80℃24h→液氮储存
- 复苏验证
- 复苏存活率≥85%（贴壁率≥70%）
- 特性验证：STR分型匹配率≥95%，TP53基因突变位点检测
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 干冰运输超48小时导致细胞复苏失败
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供电镜照片）
- 细胞STR分型与ATCC标准库偏差＞3个位点
- 不予重发情形
- 使用无血清培养基导致细胞分化
- 未按规范进行TP53基因状态检测
- 接种密度低于1×10³ cells/cm²引发衰老
- 未定期进行支原体清除处理
